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Validación de la citometría de flujo para evaluar respuestas inmunes en anfibios

Las evaluaciones del estado inmunológico de renacuajos o adultos de anfibios se han realizado habitualmente de manera indirecta, como por ejemplo midiendo la inflamación en la piel tras administrar fitohemaglutinina (PHA), o de manera directa aunque tediosa a través de recuentos sanguíneos en frotis de sangre. En este estudio se valida un sencillo método en el que tiñendo las células sanguíneas con un tinte lipofílico (3,3? Dipentyloxacarbocyanine) y usando un citómetro de flujo se puede determinar la respuesta inmune de los individuos de manera rápida y económica. Para ello, se altera experimentalmente el estado inmunológico de renacuajos de Pelobates cultripes añadiendo corticosterona al agua, y se determinan los niveles de leucocitos usando tanto citometría de flujo como frotis de sangre. Se observa que, tras ajustar algunos parámetros en el citómetro, ambos métodos midieron de manera similar los cambios inmunológicos esperados en renacuajos expuestos a la hormona. Además, una vez validado, la citometría de flujo permitió obtener valores absolutos de leucocitos. Finalmente se discute la idoneidad de ambas técnicas atendiendo a la precisión de cada una, así como a los requerimientos de volumen de muestra necesarios o a la facilidad para ser usadas en estudios de campo. informacion[at]ebd.csic.es: Burraco et al (2017) Validated flow cytometry allows rapid quantitative assessment of immune responses in amphibians. Amphib-reptil DOI:10.1163/15685381-00003093


http://booksandjournals.brillonline.com/content/journals/10.1163/15685381-00003093
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