Con una población aproximada de 300 ejemplares, el Caballo de las Retuertas se localiza principalmente en el Espacio Natural de Doñana, concretamente en la Reserva Biológica de Doñana y en la Reserva de Guadiamar. Animales usados antaño por la población local de Doñana como animal de trabajo y medio de locomoción, actualmente viven en estado asilvestrado. En 2003 se realizó un muestreo de la población estableciéndose su perfil genético y las distancias genéticas frente a otras razas.